Elektroforézis: mi ez, mire szolgál és hogyan történik

Tartalom

• Mire való
• Hogyan történik
• Az elektroforézis típusai
• 1. Hemoglobin elektroforézis
• 2. Fehérje elektroforézis

Az elektroforézis olyan laboratóriumi technika, amelyet a molekulák méretük és elektromos töltésük szerinti szétválasztása céljából végeznek, hogy fel lehessen állítani a betegségek diagnózisát, ellenőrizni lehet a fehérje expresszióját vagy azonosítani a mikroorganizmusokat.

Az elektroforézis egyszerű és olcsó eljárás, amelyet laboratóriumi rutinokban és kutatási projektekben alkalmaznak. Az elektroforézis céljától függően szükség lehet egyéb vizsgálatok és vizsgák elvégzésére, például a diagnózis eléréséhez.

Mire való

Az elektroforézis különböző célokra hajtható végre, mind a kutatási projektekben, mind a diagnózisban, mivel ez egyszerű és olcsó technika.Így elektroforézis végezhető:

• Vírusok, gombák, baktériumok és paraziták azonosítása, ez az alkalmazás gyakoribb a kutatási projektekben;
• Apasági teszt;
• Ellenőrizze a fehérjék expresszióját;
• Azonosítsa a mutációkat, amelyek hasznosak lehetnek például a leukémia diagnosztizálásában;
• Elemezze a keringő hemoglobin típusait, amelyek hasznosak a sarlósejtes vérszegénység diagnosztizálásában;
• Mérje fel a vérben jelenlévő fehérjék mennyiségét.

Az elektroforézis céljától függően szükség lehet egyéb kiegészítő vizsgálatok elvégzésére az orvos számára a diagnózis befejezéséhez.

Hogyan történik

Az elektroforézis elvégzéséhez szükség van a gélre, amely lehet a céltól függően poliakrilamid vagy agaróz, az elektroforézis puffer és a tartály, a molekulatömeg-marker és a fluoreszcens festék, UV vagy LED fényberendezés mellett, más néven transzilluminátor.

A gél elkészítése után egy meghatározott tárgyat kell elhelyezni úgy, hogy a lyukak a gélben készüljenek, népi nevén fésűnek, és hagyják, hogy a gél megdermedjen. Amikor a gél elkészült, csak vigye fel az anyagokat a lyukakba. Ehhez egy molekulatömeg-markert kell elhelyezni az egyik üregben, egy pozitív kontrollt, amely az az anyag, amely ismert, mi az a negatív kontroll, amely garantálja a reakció érvényességét, és az elemzendő mintákat. Valamennyi mintát el kell keverni egy fluoreszcens festékkel, mivel így a transzilluminátoron megjeleníthetők a sávok.

A mintákkal ellátott gélt az elektroforézis tartályba kell helyezni, amely a specifikus pufferoldatot tartalmazza, majd az eszközt be kell kapcsolni, hogy legyen elektromos áram és következésképpen potenciálkülönbség, ami fontos a szétválasztó részecskék számára azok tulajdonságaik szerint. terhelés és méret. Az elektroforetikus futási idő az eljárás céljától függően változik, és legfeljebb 1 óráig tarthat.

A megadott idő elteltével megtekinthető a transzilluminátoron átfutott elektroforetikus eredmény. Amikor a gélt UV vagy LED fény alá helyezzük, lehetőség van a sávosodás mintázatának megjelenítésére: minél nagyobb a molekula, annál kisebb a vándorlása, közelebb kerülve a kúthoz, míg a világosabb molekula annál nagyobb a migrációs potenciál.

A reakció validálásához a pozitív kontroll sávjait vizualizálni kell, és a negatív kontrollban semmit sem szabad vizualizálni, mivel ellenkező esetben ez azt jelzi, hogy szennyeződés volt, és az egész folyamatot meg kell ismételni.

Az elektroforézis típusai

Az elektroforézis különböző célokra hajtható végre, és rendeltetésének megfelelően többféle gél használható, a leggyakoribb a poliakrilamid és az agaróz.

A mikroorganizmusok azonosítására szolgáló elektroforézist gyakoribb a kutatólaboratóriumokban végzik, azonban diagnosztikai célokra elektroforézissel lehet azonosítani a hematológiai betegségeket és a fehérjék mennyiségének növekedésével együtt kialakuló betegségeket, amelyek az elektroforézis fő típusai:

1. Hemoglobin elektroforézis

A hemoglobin elektroforézis egy laboratóriumi technika, amelyet a vérben keringő különböző hemoglobin típusok azonosítására végeznek, lehetővé téve a hemoglobin szintézissel kapcsolatos betegségek jelenlétének azonosítását. A hemoglobin típusát elektroforézissel lehet meghatározni specifikus pH-értéken, ideális esetben 8,0 és 9,0 között, a normál mintához hasonlítható sávmintával, amely lehetővé teszi a kóros hemoglobinok azonosítását.

Mire készült: A hemoglobin-elektroforézist a hemoglobin-szintézissel kapcsolatos betegségek, például a sarlósejtes vérszegénység és a hemoglobin-C-betegség kivizsgálására és diagnosztizálására végzik, amellett, hogy hasznos a thalassemia megkülönböztetésében. Ismerje meg a hemoglobin elektroforézis értelmezését.

2. Fehérje elektroforézis

A fehérje elektroforézis olyan vizsgálat, amelyet az orvos kért a vérben keringő fehérjék mennyiségének felmérésére és ezáltal a betegségek azonosítására. Ezt a vizsgálatot vérmintából végzik, amelyet centrifugálva megkapják a plazmát, a vér azon részét, amely többek között fehérjékből áll.

Az elektroforézis után a sávok mintázata láthatóvá válik, és ezt követően egy grafikon, amelyben a fehérjék egyes frakcióinak mennyisége feltüntetésre kerül, ami alapvető fontosságú a diagnózis szempontjából.

Mire készült: A fehérje elektroforézis lehetővé teszi az orvos számára, hogy a vizsgálati jelentésben bemutatott sávminta és grafikon szerint kivizsgálja a myeloma multiplex, dehidráció, cirrhosis, gyulladás, májbetegség, hasnyálmirigy-gyulladás, lupus és magas vérnyomás előfordulását.

Megérteni, hogyan történik, és hogyan lehet megérteni a fehérje elektroforézis eredményét.